Obtención de tres consorcios microbianos de suelos de un bosque primario y comparación de sus capacidades de biodegradación de hidrocarburos aromáticos policíclicos, Región Loreto

Abstract

Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are a cause of great public concern due to their harmful effects on the environment and human health, which is why there is interest in obtaining consortia composed of different species of PAH-degrading microorganisms. The general objective of this research was to obtain three microbial consortia from soils of a primary forest and compare their capacities for biodegrading polycyclic aromatic hydrocarbons. To do this, the samples were first cultured for 10 days in Bushnell Haas (BH) medium with 1% petroleum. Then, they were cultured for 30 days in BH medium with PAHs, performing subcultures every 10 days. Microbial growth was evaluated by measuring the optical density at 600 nm, and the presence of microorganisms was verified by Gram staining, ethidium bromide staining, and lactophenol blue staining. In addition, metagenomic DNA (mDNA) was purified, followed by spectrophotometric and electrophoretic analysis. Subsequently, mDNA was amplified by PCR. Finally, the biodegrading capacity of the consortia was determined by measuring the total polyphenol (TP) content. Three PAH biodegrading microbial consortia were obtained, consisting of Gram-positive and -negative cocci, bacilli, coccobacilli, and yeasts. Good quality, quantity, and integrity mDNA was also obtained, and successful PCR amplification was achieved. Finally, the biodegradation capacities of the three microbial consortia were compared. In conclusion, three microbial consortia were obtained, and their growth and biodegradation capacities using PAHs were evaluated.

Los hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) son motivo de gran preocupación pública debido a sus efectos nocivos para el ambiente y la salud humana, es por ello, el interés en la obtención de consorcios compuestos por especies diferentes de microorganismos degradadores de HAPs. El objetivo general de la presente investigación fue obtener tres consorcios microbianos de suelos de un bosque primario y comparar sus capacidades de biodegradación de hidrocarburos aromáticos policíclicos. Para ello, primero se cultivaron las muestras durante 10 días en medio Bushnell Haas (BH) con 1% de petróleo. Luego, se cultivaron durante 30 días en medio BH con HAPs, realizando subcultivos cada 10 días. El crecimiento microbiano se evaluó midiendo la densidad óptica a 600 nm, y se verificó la presencia de microorganismos mediante la tinción Gram, tinción con bromuro de etidio y tinción con azul de lactofenol. Además, se realizó la purificación del ADN metagenómico (ADNm), seguido de análisis espectrofotométrico y electroforético. Posteriormente, se amplificó el ADNm mediante PCR. Finalmente, se determinó la capacidad biodegradadora de los consorcios midiendo el contenido de polifenoles totales (TP). Se obtuvieron tres consorcios microbianos biodegradadores de HAPs, conformados por cocos, bacilos y cocobacilos Gram positivos y negativos, y levaduras. También se obtuvo ADNm de buena calidad, cantidad e integridad, y se logró una amplificación exitosa por PCR. Finalmente, se compararon las capacidades de biodegradación de los tres consorcios microbianos. En conclusión, se logró obtener tres consorcios microbianos, la evaluación de su crecimiento y capacidades de biodegradación empleando HAPs.