Perfil de respuesta inmune humoral de individuos con malaria sintomática y asintomática contra antígenos excretados-secretados producidos en cultivos in vitro de Plasmodium falciparium

Abstract

Malaria por Plasmodium falciparum presenta variabilidad genética, por consiguiente, diversas proteínas antigénicas como los antígenos excretados-secretados también conocidos como exoantígenos, que se encargan de brindar al parásito los mecanismos necesarios para evadir el sistema inmune del huésped. En este estudio se trabajó con el sobrenadante de cultivos de P. falciparum cepa 3D7, colectados con medio RPMI 1640 libre de albumax y con parasitemias ≥20%. Se evaluaron diferentes parámetros como crecimiento, cuantificación proteica del sobrenadante y mediante inmunoblot se evaluó el perfil de respuesta de individuos con diagnóstico positivo a malaria por P. falciparum (Sintomáticos (n=24), Asintomáticos (n=24)), muestras con diagnóstico negativo a malaria de Zona endémica (ZE; n=16), Zona no endémica (ZNE; n=3) y Otras enfermedades (OE; n=16). Así mismo, se elaboró un dendrograma para conocer las posibles similitudes entre los casos clínicos. Los exoantígenos colectados en 24 horas, 37°C, Htc=20% y P=20%, fueron los que presentaron mayor número de bandas (22 bandas, Peso Molecular desde 12 – 148 kDa, 20 fueron inmunoreactivas a Pool Pf(+). De las cuales, 9 (148, 139, 124, 120, 116, 110, 72, 53, 12 kDa) corresponden a los casos de malaria por P. falciparum. Con el uso del dendrograma se identificaron grupos con diversos perfiles entre sintomáticos y asintomáticos, esto debido que tuvieron previamente esta infección. De esta manera, se muestra que los exoantígenos evaluados permiten conocer el perfil de la respuesta inmune humoral a la infección, el cual puede ser implementado Malaria por Plasmodium falciparum presenta variabilidad genética, por consiguiente, diversas proteínas antigénicas como los antígenos excretados-secretados también conocidos como exoantígenos, que se encargan de brindar al parásito los mecanismos necesarios para evadir el sistema inmune del huésped. En este estudio se trabajó con el sobrenadante de cultivos de P. falciparum cepa 3D7, colectados con medio RPMI 1640 libre de albumax y con parasitemias ≥20%. Se evaluaron diferentes parámetros como crecimiento, cuantificación proteica del sobrenadante y mediante inmunoblot se evaluó el perfil de respuesta de individuos con diagnóstico positivo a malaria por P. falciparum (Sintomáticos (n=24), Asintomáticos (n=24)), muestras con diagnóstico negativo a malaria de Zona endémica (ZE; n=16), Zona no endémica (ZNE; n=3) y Otras enfermedades (OE; n=16). Así mismo, se elaboró un dendrograma para conocer las posibles similitudes entre los casos clínicos. Los exoantígenos colectados en 24 horas, 37°C, Htc=20% y P=20%, fueron los que presentaron mayor número de bandas (22 bandas, Peso Molecular desde 12 – 148 kDa, 20 fueron inmunoreactivas a Pool Pf(+). De las cuales, 9 (148, 139, 124, 120, 116, 110, 72, 53, 12 kDa) corresponden a los casos de malaria por P. falciparum. Con el uso del dendrograma se identificaron grupos con diversos perfiles entre sintomáticos y asintomáticos, esto debido que tuvieron previamente esta infección. De esta manera, se muestra que los exoantígenos evaluados permiten conocer el perfil de la respuesta inmune humoral a la infección, el cual puede ser implementado para estudiar la respuesta inmune humoral con cultivos de cepas nativas de P. falciparum.

Plasmodium falciparum malaria presents genetic variability, therefore, various antigenic proteins such as excreted-secreted antigens also known as exoantigens, which are responsible for providing the parasite with the necessary mechanisms to evade the host's immune system. In this study, we worked with the culture supernatant of P. falciparum strain 3D7, collected with RPMI 1640 medium free from albumax and with parasitemias ≥20%. Different parameters such as growth, protein quantification of the supernatant were evaluated and the response profile of individuals with a positive diagnosis of P. falciparum malaria was evaluated (Symptomatic (n = 24), Asymptomatic (n = 24)), samples with diagnosis negative to malaria from Endemic Zone (ZE; n = 16), Non-endemic Zone (ZNE; n = 3) and Other diseases (OE; n = 16). Likewise, a dendrogram was prepared to determine the possible similarities between the clinical cases. The exoantigens collected in 24 hours, 37 ° C, Htc = 20% and P = 20%, were the ones with the highest number of bands (22 bands, Molecular Weight from 12 - 148 kDa, 20 were immunoreactive with Pool Pf (+) Of which, 9 (148, 139, 124, 120, 116, 110, 72, 53, 12 kDa) correspond to cases of P. falciparum malaria. Using the dendrogram, groups with different profiles between symptomatic were identified. and asymptomatic, because they previously had this infection. In this way, it is shown that the exoantigens evaluated allow to know the profile of the humoral immune response to the infection, which can be implemented to study the humoral immune response with cultures of native strains P. falciparum.